這篇論文研究了新型抗腫瘤候選藥物5-綠原酸（5-CQA）注射液在人體內(nèi)的代謝產(chǎn)物。

人體肌肉注射注射用綠原酸后，尿液鑒定程序

研究背景

1、5-CQA注射液是一種新型的抗腫瘤候選藥物，目前正在中國(guó)進(jìn)行臨床試驗(yàn)（I期）。然而，關(guān)于其在人體內(nèi)的代謝產(chǎn)物尚不明確。

2、研究藥物代謝產(chǎn)物的難點(diǎn)在于代謝產(chǎn)物的多樣性和復(fù)雜性，尤其是在復(fù)雜的生物樣本中分離和鑒定這些代謝產(chǎn)物。

3、已有研究表明，5-CQA具有多種藥理活性，包括抗菌、抗氧化、鎮(zhèn)痛、解熱和抗癌作用。然而，關(guān)于5-CQA在人體內(nèi)的代謝產(chǎn)物研究較少，特別是在肌肉注射后的代謝情況。

研究方法

1、使用高效液相色譜-高分辨質(zhì)譜（HPLC-HRMS/MS^n）和高效液相色譜-固相萃取-核磁共振（HPLC-SPE-NMR）技術(shù)分析了健康成人肌肉注射5-CQA注射液后的尿液和糞便樣本。

2、樣品制備包括尿樣和糞樣的收集與處理。尿樣在第一天分三段（0-3小時(shí)、3-4小時(shí)和4-6小時(shí)）收集，第二天到第五天收集0-3小時(shí)的尿樣。糞樣在給藥后第一天0-24小時(shí)內(nèi)收集。

4、HPLC-HRMS/MS^n分析條件包括使用Waters Symmetry C18柱（250 mm × 4.6 mm, 3 μm），流動(dòng)相為0.1%甲酸水溶液和甲醇，流速為0.9 mL/min，使用負(fù)離子模式進(jìn)行檢測(cè)。

5、HPLC-SPE-NMR分析條件包括使用Agilent 1260系統(tǒng)，分離模式為梯度洗脫，使用Hysphere GP-phase SPE柱進(jìn)行目標(biāo)化合物的富集。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、在尿液樣本中，共鑒定出六種代謝產(chǎn)物，包括異構(gòu)化的5-CQA（P1和P2）、水解的5-CQA（M1和M2）和甲基化的5-CQA（M3和M4）。其中，M3和M4是主要的代謝產(chǎn)物。

2、使用HPLC-SPE-NMR技術(shù)對(duì)M3和M4的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征，結(jié)果顯示M3和M4的甲氧基分別位于C-3′和C-4′。

3、由于沒(méi)有商業(yè)參考品，M3和M4的純品通過(guò)5-CQA甲基化合成并進(jìn)行分離純化。合成樣品經(jīng)過(guò)HPLC分析和NMR驗(yàn)證，確認(rèn)其與尿液樣本中的M3和M4為同一化合物。

結(jié)果與分析

1、通過(guò)HPLC-HRMS/MS^n方法，成功鑒定了尿液中的六種代謝產(chǎn)物，并確認(rèn)M3和M4為主要代謝產(chǎn)物。

2、HPLC-SPE-NMR分析結(jié)果顯示，M3和M4的甲氧基分別位于C-3′和C-4′，進(jìn)一步驗(yàn)證了其結(jié)構(gòu)。

3、反向分子對(duì)接分析預(yù)測(cè)了M3和M4對(duì)惡性膠質(zhì)瘤相關(guān)靶點(diǎn)的潛在活性，結(jié)果顯示M3和M4在多個(gè)惡性膠質(zhì)瘤相關(guān)通路中具有多種相互作用。

總體結(jié)論

1、這是首次闡明5-CQA注射液甲基化代謝產(chǎn)物M3和M4的結(jié)構(gòu)，并支持了臨床人體質(zhì)量平衡研究。

2、研究結(jié)果為理解5-CQA注射液在人體內(nèi)的代謝提供了新的見(jiàn)解，并為其臨床應(yīng)用提供了支持。

通過(guò)這篇論文，研究人員詳細(xì)研究了5-CQA注射液在人體內(nèi)的代謝情況，并為進(jìn)一步的臨床研究提供了重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論支持。

文獻(xiàn)鏈接