這篇論文研究了口服自微乳化藥物遞送系統(tǒng)（SMEDDS）對綠原酸（CHA）的淋巴運(yùn)輸和腸系膜淋巴結(jié)（MLNs）靶向輸送，以提高有效的T細(xì)胞抗腫瘤免疫。

CHA-SME對免疫細(xì)胞的制備、腸道淋巴轉(zhuǎn)運(yùn)和免疫調(diào)節(jié)作用的示意圖

研究背景

1、腸系膜淋巴結(jié)（MLNs）是免疫系統(tǒng)的重要淋巴節(jié)點(diǎn)，容納了體內(nèi)超過一半的淋巴細(xì)胞，具有作為癌癥免疫治療靶點(diǎn)的潛力。

2、由于淋巴結(jié)的結(jié)構(gòu)和解剖特點(diǎn)，傳統(tǒng)藥物遞送途徑難以有效到達(dá)淋巴結(jié)，且免疫調(diào)節(jié)劑的口服生物利用度低，淋巴積累有限。

3、自微乳化藥物遞送系統(tǒng)（SMEDDS）已被證明可以通過腸道淋巴運(yùn)輸途徑提高藥物的口服生物利用度，但其在免疫調(diào)節(jié)劑向MLNs的高效遞送方面的研究較少。

研究方法

1、開發(fā)了CHA-封裝的SMEDDS（CHA-SME），通過溶劑蒸發(fā)法制備CHA-磷脂復(fù)合物，并將其與油相、表面活性劑和助表面活性劑混合，形成透明的微乳液。

2、使用Caco-2細(xì)胞和SD大鼠進(jìn)行體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，評估CHA-SME的腸上皮細(xì)胞透過性、淋巴運(yùn)輸能力和免疫調(diào)節(jié)效果。

3、通過動態(tài)光散射（DLS）、透射電子顯微鏡（TEM）和原子力顯微鏡（AFM）等方法對CHA-SME的粒徑、分布和zeta電位進(jìn)行表征。

實(shí)驗(yàn)設(shè)計

1、體外實(shí)驗(yàn)：評估CHA-SME對Caco-2細(xì)胞和C6細(xì)胞的細(xì)胞毒性，使用CCK-8試劑盒測定細(xì)胞活力，并通過LDH釋放實(shí)驗(yàn)評估細(xì)胞膜完整性。

2、細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)：使用共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM）和流式細(xì)胞術(shù)定量分析Cou-6標(biāo)記的CHA-SME在Caco-2細(xì)胞中的攝取情況。

4、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：建立皮下和原位膠質(zhì)瘤模型，評估CHA-SME的抗腫瘤效果和免疫調(diào)節(jié)作用。通過熒光成像和流式細(xì)胞術(shù)分析CHA-SME在腸道和MLNs中的分布情況。

結(jié)果與分析

1、CHA-SME顯著提高了CHA在腸道上皮細(xì)胞中的滲透性，并通過淋巴運(yùn)輸途徑促進(jìn)了藥物在MLNs中的積累。

2、在體外實(shí)驗(yàn)中，CHA-SME對Caco-2細(xì)胞和C6細(xì)胞的細(xì)胞毒性較低，細(xì)胞活力在CHA濃度為0.01-100 µM時接近100%。

3、在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，CHA-SME顯著抑制了皮下和原位膠質(zhì)瘤的生長，腫瘤生長抑制率（TGI%）顯著高于游離CHA組。

4、CHA-SME顯著促進(jìn)了樹突狀細(xì)胞（DCs）的成熟和T細(xì)胞的活化，增加了腫瘤組織中浸潤的CD3+、CD4+和CD8+ T細(xì)胞的比例。

總體結(jié)論

1、CHA-SME通過淋巴運(yùn)輸途徑高效地將CHA遞送到MLNs，促進(jìn)了免疫細(xì)胞的活化和抗腫瘤免疫反應(yīng)。

2、口服CHA-SME為膠質(zhì)瘤的MLNs靶向癌癥免疫治療提供了一種潛在策略，能夠繞過免疫檢查點(diǎn)阻斷療法中的穿透性差和耐藥性問題。

3、該研究強(qiáng)調(diào)了通過促進(jìn)藥物在MLNs中的積累來增強(qiáng)淋巴細(xì)胞接觸和抗腫瘤免疫活性的高效性。

這篇論文展示了CHA-SME在提高CHA的免疫治療效果方面的潛力，為癌癥免疫治療提供了新的思路。

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