Chlorogenic Acid Induced Neuroblastoma Cells Differentiation via the ACAT1-TPK1-PDH Pathway
這篇論文研究了綠原酸（Chlorogenic Acid, CHA）通過ACAT1-TPK1-PDH途徑誘導(dǎo)神經(jīng)母細胞瘤細胞分化。
綠原酸（CHA）調(diào)節(jié)ACAT1-TPK1-PDH通路促進神經(jīng)母細胞瘤分化
研究背景
1、神經(jīng)母細胞瘤是一種在未分化的交感神經(jīng)節(jié)細胞中發(fā)展的癌癥，具有高發(fā)病率，尤其在兒童中。目前的治療方法包括化療、干細胞移植、手術(shù)、放療等，但這些方法無法有效抑制腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。
2、神經(jīng)母細胞瘤的高度異質(zhì)性限制了現(xiàn)有治療方法的療效，并導(dǎo)致藥物耐藥性。因此，迫切需要研究新的治療機制和方法。
3、維甲酸（RA）是目前最有效的誘導(dǎo)神經(jīng)母細胞瘤分化的藥物，但對MYCN擴增的患者無效。綠原酸（CHA）是一種從植物中提取的小分子天然化合物，具有抗炎、抗氧化和抗腫瘤活性，但其對神經(jīng)母細胞瘤的作用尚未被評估。
研究方法
1、使用Be(2)-M17和SH-SY5Y神經(jīng)母細胞瘤細胞系來確認分化表型。細胞在CHA處理后，通過EdU染色、細胞周期分析、遷移和克隆形成能力測試等方法評估其分化情況。
2、構(gòu)建了皮下和原位異種移植小鼠模型，評估CHA的抗腫瘤活性。通過Ki-67表達和MAP2分化標志物的水平來評估腫瘤生長情況。
3、使用Seahorse實驗和代謝組學(xué)分析研究CHA及其靶點ACAT1在線粒體代謝中的作用。通過檢測氧消耗率（OCR）來評估細胞的氧化磷酸化（OXPHOS）能力。
實驗設(shè)計
1、CHA處理后，Be(2)-M17和SH-SY5Y細胞的增殖速度減慢，細胞形態(tài)發(fā)生明顯變化，細胞周期在G0/G1期被阻滯，遷移和克隆形成能力減弱。
2、在小鼠模型中，CHA顯著抑制了腫瘤生長，且未導(dǎo)致體重下降。原位異種移植模型也顯示了類似的結(jié)果。
3、代謝組學(xué)分析顯示，CHA處理后，硫胺素代謝途徑被激活，TPK1表達上調(diào)，PDH酶活性增強。
結(jié)果與分析
1、CHA通過抑制ACAT1誘導(dǎo)神經(jīng)母細胞瘤細胞分化。ACAT1敲除后，細胞形態(tài)趨于成熟，腫瘤生長緩慢，Ki-67表達減少，MAP2表達增加。
2、CHA處理恢復(fù)了神經(jīng)母細胞瘤細胞的OXPHOS能力，ACAT1敲除也觀察到類似結(jié)果。
3、硫胺素代謝途徑在ACAT1介導(dǎo)的分化中起重要作用。CHA和ACAT1敲除均上調(diào)了TPK1表達，激活了硫胺素代謝途徑，增強了PDH酶活性。
總體結(jié)論
CHA通過抑制線粒體ACAT1促進神經(jīng)母細胞瘤細胞分化。ACAT1的消除上調(diào)了TPK1表達，激活了硫胺素代謝途徑，并恢復(fù)了細胞的OXPHOS功能。研究為CHA在神經(jīng)母細胞瘤治療中的臨床應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)，并為神經(jīng)母細胞瘤的治療提供了一個有吸引力的靶點和方案。